適應無血清培養基
許多連續細胞系,如HeLa,CHO-K1或小鼠骨髓廇可能可以適應于缺乏血清的生長環境.適應過程常常是一個很長的選擇周期,此間只有細胞群體中的少數被選擇出來,因此在此選擇過程中確保細胞系的性質不喪失是很重要的.如果是骨髓瘤細胞,其目的是用于制備雜交廇,而如果是CHO細胞則用于做轉染實驗,因此用無血清培養基的選擇培養必須在融合和轉染之前進行,使選擇過程中丟失特性的危險性降到低.
適應無血清培養基通常要經過幾次連續的傳代培養,使血清濃度逐漸降低.一旦細胞在某一血清濃度條件下形成穩定的增殖狀態,就可用更低濃度的血清將細胞傳代培養,直至穩定的生長增殖再次形成,而后再次稀釋血清.如果是懸浮培養,要計算活細胞的數量 ,根據活細胞的數量稀釋細胞懸液,此時需要保持的低細胞濃度要比正常傳代培養所需的細胞濃度高一些.對于單層細胞培養,可在傳代培養的前幾天先降低培養基中的血清濃度,而后再用新的低濃度培養基進行傳代培養.在適應過程中,可能有必要在培養基中添加一些已知的因子來代替血清.
