DAB顯色試劑盒（20×）說明書

   DAB Kit（20×）

   DAB顯色試劑盒（20×）

   目錄號：K0125

保存條件：2-8℃保存。

組分說明

                    Cat. No.                K0125        K0125A

                    Kit Size                 20 ml         60 ml

                    DAB-試劑  A（20×）    1 ml           3 ml

                    DAB-試劑  B（1×）      20 ml         60 ml

   產(chǎn)品簡介

    DAB（3,3′N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride）是辣根過氧化物酶（HRP）

的常用底物，在辣根過氧化物酶的催化下，  DAB會產(chǎn)生不溶于水和乙醇的棕色沉淀。

該試劑盒適用于HRP系統(tǒng)的的免疫組化中的組織切片、細胞爬片以及Western  Blot中

PVDF膜、NC膜等的染色。辣根過氧化物酶可以催化底物  DAB在目的蛋白所在的位置

轉(zhuǎn)變?yōu)楹稚幕衔铮筛鶕?jù)顏色反應(yīng)來確定目的蛋白的位置及表達情況。

注意事項

 1．工作液現(xiàn)配現(xiàn)用，配制好的工作液2-8°C避光1小時內(nèi)有效。

2．工作液用量必需充足，保證*覆蓋組織片或印跡膜。

3．顯色后的組織切片或細胞爬片可用蘇木精或甲基綠復(fù)染。

4．對于組織切片，以每張切片用50 µl顯色工作液計算，1  ml  20×DAB為400張切片的用量，3 ml為1200張切片的用量。

5．為獲得Z佳實驗結(jié)果，請務(wù)必優(yōu)化實驗條件。

6．顯色后若背景太深，可以考慮延長封閉時間，避免非特異性染色，或者縮短DAB的

    顯色時間；顯色后若顯色太弱或沒有顯色，可以考慮增加一抗或二抗的濃度，或者

    適當(dāng)延長顯色時間。

7．DAB為可疑致癌物，使用時請采取必要的防護措施。

8．本產(chǎn)品僅用于科研，不能用于人體反應(yīng)或人體治療。

使用方法

1．DAB顯色工作液配制：根據(jù)需要量，將試劑A和試劑B以1：19的體積比混勻后即為

    DAB顯色工作液。也可選擇每毫升試劑B中滴加1滴（約50 µl）試劑A，混勻即可。

2．顯色：1）印跡膜顯色：將配制好的工作液滴加在印跡膜上（或?qū)⒂≯E膜傾入到DAB

    工作液中）即可顯色。顯色時間一般為1-5分鐘。顯色完畢后，將膜浸入水中，終

    止反應(yīng)。

    2）組織切片或細胞爬片顯色：加適量的  DAB顯色工作液于需要顯色的組織切片或

     細胞爬片上即可顯色，顯色時間一般為  1-5分鐘。顯微鏡下觀察控制顯色時間，當(dāng)

     達到Z佳顯色效果后，自來水沖洗終止顯色。顯色后的切片經(jīng)復(fù)染、脫水透明，封

     片后可長*++期保存。

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