血磷濃度檢測試劑盒說明書

微量法

注意：正式測定之前選擇2-3 個預期差異大的樣本做預測定。

規格：100T/96S

測定意義：

血磷主要指血中的無機磷， 以無機磷鹽的形式存在。血漿中鈣、磷濃度關系密切，在以 mg/dL表 示時，二者的乘積(  [Ca] ×  [P] )為 30~40 。當(  [Ca] ×  [P] )>40 ，則鈣和磷以骨鹽形式沉積于骨 組織；若(  [Ca] ×  [P] )<35 則妨礙骨的鈣化，甚至可使骨鹽溶解，影響成骨作用。血鈣和血磷含量 的相對穩定依賴于鈣、磷的吸收與排泄和鈣化及脫鈣兩種代謝的相對平衡。上述平衡受到維生素 D3 、 甲狀旁腺素和降鈣素等激素的調節。

測定原理：

去除血清中有機磷后，無機磷鹽與鉬酸銨試劑生成磷鉬酸，被硫酸亞鐵還原后呈藍色，在620nm 有光吸收；通過測定620nm吸光度，計算血液中磷含量。

自備儀器和用品：

離心機、可調式移液槍、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。 試劑組成和配置：

試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。

試劑二：液體×1 瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1 瓶，4℃保存。  臨用前配制，依次加入11mL蒸餾水充分溶解，再加入試劑二，充

分混合。

標準液：液體×1 支，1mmol/L無機磷，4℃保存。

血磷濃度測定操作：

1. 分光光度計/酶標儀預熱30min 以上，調節波長到620nm ，蒸餾水調零。

2. 取出標準液，室溫解凍。

3. 血清預處理： 吸取50μL血清，加950μL試劑一，混勻后室溫8000rpm ，離心10min ，取上清液，待 測。

4. 空白管：取微量石英比色皿/96孔板，依次加入50μL蒸餾水，50μL試劑一，100μL試劑 三，混勻后靜置10min ，于620nm測定吸光度，記為A空白管。

5. 標準管：取微量石英比色皿/96孔板，依次加入50μL標準液，50μL試劑一，100μL試劑 三，混勻后靜置10min ，于620nm測定吸光度，記為A標準管。

6. 測定管：取微量石英比色皿/96孔板，依次加入50μL上清液，50μL試劑一，100μL試劑

三，混勻后靜置10min ，于620nm測定吸光度，記為A測定管。

注意：空白管和標準管只需測定一次。

血磷濃度計算：

血磷含量 ( mmol/dL) =[C 標準液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)]× 樣品稀釋倍數 ×V 樣總=2×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標準管－A 空白管)

C 標準液：1 mmol/L；樣品稀釋倍數：  (50μL血清+950μL試劑一) ÷50μL血清=20。

注意事項：

1 、 試劑三需臨用前配制，如未用完，4℃保存，最多可使用3天；

本產品僅供科學研究使用！請勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測等用途！

2 、 測定過程中，應盡量避免溶血，因為紅細胞中有機磷酯進入血清后可被酶水解而使得血 清無機磷含量增高。

3 、 最低檢出限為0. 1mmol/L。

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