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          人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16 實驗原理
          更新時間:2010-09-09 點擊次數:2511次

             人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγR/CD16 實驗原理                 

                                                                                    
          產品名稱:人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγR/CD16)ELISA Kit

           

          規格:原裝/96T ELISA試劑盒 分裝 48T/96T ELISA試劑盒

          實驗原理:人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγR/CD16)ELISA Kit

           

            本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγR/CD16)ELISA Kit

          水平。用純化的免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγR/CD16)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγR/CD16)再與HRP標記的免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγR/CD16)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγR/CD16)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人免疫球蛋白G Fc段受體Ⅲ(FcγR/CD16濃度。

           

          樣本處理及要求

          1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。

          2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000/分)去除顆粒。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

          3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

          4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBSPH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

          5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

          6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20保存,但應避免反復凍融.

          7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

          試劑盒組成:

          1

          20倍濃縮洗滌液

          30ml×1

          7

          終止液

          6ml×1

          2

          酶標試劑

          6ml×1

          8

          標準品(180 ng/L

          0.5ml×1

          3

          酶標包被板

          12孔×8

          9

          標準品稀釋液

          1.5ml×1

          4

          樣品稀釋液

          6ml×1

          10

          說明書

          1

          5

          顯色劑A

          6ml×1

          11

          封板膜

          2 

          6

          顯色劑B

          6ml×1/

          12

          密封袋

          1

          注意事項::

          1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

          2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

          3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

          4.   請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔OD值的),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

          5.   嚴格按說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

          6.本試劑不同批號組分不得混用。

          7.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

          8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

          9.底物請避光保存。

          安全性
          1
           避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
          2
           實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
          3
           不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。

          4   Elisa試劑盒請遠離兒童

          自備物品:

          1 37 ℃ 恒溫箱

          2 、 標準規格酶標儀

          3 、 精密移液器及一次性吸頭

          4 、 蒸餾水

          5 、 一次性試管

          6 、 吸水紙

           

          保存條件及有效期:

          1.試劑盒保存:;2-8℃。

          2.有效期:6個月

           


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