實驗方法：
酶聯免疫法/酶免法（ELISA）凡購買目錄本公司ELISA檢測試劑盒可提供代測服務。
實驗原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠瘦素（leptin）水平。用純化的大鼠瘦素（leptin）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入瘦素（ leptin），再與 HRP標記的瘦素（ leptin）抗體結合，形成抗體 -抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的瘦素（ leptin）呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度（ OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠瘦素（ leptin）濃度。

樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收

集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心

20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再

次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存

過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000

轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，

細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心

20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次

離心
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保

存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻

漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后

一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬

上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

檢測范圍:

0.3μg/L -8μg/L

保存條件及有效期：
1     2-8℃。
2     6個月